Ngày nhận bài: 20-11-2019
Ngày duyệt đăng: 16-06-2020
DOI:
Lượt xem
Download
Cách trích dẫn:
NGHIÊN CỨU KHẢ NĂNG KÍCH THÍCH SINH CYTOKINES CỦA PROTEIN TÁI TỔ HỢP INTERLEUKIN-2 TRÊN TẾ BÀO ĐẠI THỰC BÀO
,
Trần Thị Thanh Hà
1
,
Nguyễn Thị Huyền
1
,
Chu Thị Như
1
,
Nguyễn Thị Chinh
1
,
Hoàng Văn Tuấn
1
,
Lý Đức Việt
1
,
Đặng Vũ Hoàng
1
,
Yeong Ho Hong
2
Từ khóa
Escherichia coli, Interleukin-2, gà, cytokines, protein tái tổ hợp
Tóm tắt
Interleukin-2 (IL-2) là một cytokine đa chức năng, đóng vai trò điều hòa sự nhân lên, biệt hóa và điều hòa miễn dịch của nhiều loại tế bào và vật chủ. Trong nghiên cứu này, chúng tôi sẽ dòng hóa gene mã hóa cho IL-2 của gà, biểu hiện protein tái tổ hợp IL-2 của gà và đánh giá hoạt tính sinh học của protein tái tổ hợp IL-2 trên tế bào dòng đại thực bào. Gen mã hóa cho protein IL-2 của gà (mã số AF000631 trên Ngân hàng gen quốc tế) được tái tổ hợp cùng tín hiệu Trx-Tag thioredoxin với trình tự nhận biết của hai enzyme hạn chế EcoRIở đầu 5' và HindIIIở đầu 3', được đưa vào véc tơ tách dòng pCR2.1-TA. Sau đó toàn bộ đoạn DNA được chuyển vào vị trí EcoRI- HindIIIcủa véc tơ biểu hiện pET32a(+) để tiến hành biểu hiện protein tái tổ hợp của gen IL-2 trong vi khuẩn E. coliBL21. Kết quả cho thấy đã biểu hiện thành công protein tái tổ hợp IL-2 của gà trên hệ thống E. coli. Protein IL-2 của gà tái tổ hợp không sản sinh độc tố tế bào, có khả năng kích thích sự nhân lên và sinh trưởng của tế bào dòng đại thực bào của gà. Protein IL-2 tái tổ hợp của gà kích thích tế bào dòng đại thực bảo sản sinh IFNγ, IL-1β và IL-6 mRNA. Kết quả nghiên cứu cho thấy protein IL-2 tái tổ hợp của gà có hoạt tính sinh học tự nhiên, được nhận diện bởi kháng thể kháng IL-2.
Tài liệu tham khảo
Baneyx F. (1999). Recombinant protein expression in Escherichia coli. Curr Opin Biotechnol. 10: 411-421.
Greene WC., Depper JM., Kronke M. & Leonard WJ. (1986). The human interleukin-2 receptor: role in normal T-cell growth and association with HTLV-I-induced T-cell leukemia. Cold Spring Harb Symp Quant Biol. 51(2): 731-737.
Gu J., Ruan X., Huang Z., Chen J. & Zhou J. (2010). Identification of functional domains of chicken interleukin 2. Vet Immunol Immunopathol. 134: 230-238.
Hilton LS., Bean AG., Kimpton WG. & Lowenthal JW. (2002). Interleukin-2 directly induces activation and proliferation of chicken T cells in vivo. J Interferon Cytokine Res. 22: 755-763.
Hoang CT., Hong Y., Truong AD., Lee J., Lee K. & Hong, Y.H. (2017). Molecular cloning of chicken interleukin-17B, which induces proinflammatory cytokines through activation of the NF-kappaB signaling pathway. Dev Comp Immunol. 74: 40-48.
Itoh K., Tilden AB. & Balch C.M. (1985). Role of interleukin 2 and a serum suppressive factor on the induction of activated killer cells cytotoxic for autologous human melanoma cells. Cancer Res. 45: 3173-3178.
Kampa D. & Burnside J. (2002). Jak3-regulated genes: DNA array analysis of concanavalin a-interleukin-2-activated chicken T cells treated with a specific jak3 inhibitor. J Interferon Cytokine Res. 22: 975-980.
Kawano Y. & Noma T. (1996). Role of interleukin-2 and interferon-gamma in inducing production of IgG subclasses in lymphocytes of human newborns. Immunology. 88: 40-48.
Lauener P., Huttner S., Buisson M., Hossle J.P., Albisetti M., Seigneurin J.M., Seger R.A. & Nadal D. (1995). T-cell death by apoptosis in vertically human immunodeficiency virus-infected children coincides with expansion of CD8+/interleukin-2 receptor-/HLA-DR+ T cells: sign of a possiblerole for herpes viruses as cofactors? Blood. 86: 1400-1407.
Mamontov P., Eberwine R.A., Perrigoue J., Das A., Friedman J.R. & Mora J.R. (2019). A negative role for the interleukin-2-inducible T-cell kinase (ITK) in human Foxp3+ TREG differentiation. PLoS One.14: e0215963.
McMillan D.N., Kernohan N.M., Flett M.E., Heys S.D., Deehan D.J., Sewell H.F., Walker F. & Eremin O. (1995). Interleukin 2 receptor expression and interleukin 2 localisation in human solid tumor cells in situ and in vitro: evidence for a direct role in the regulation of tumour cell proliferation. Int J Cancer. 60: 766-772.
Mergulhao F.J., Summers D.K. & Monteiro G.A. (2005). Recombinant protein secretion in Escherichia coli. Biotechnol Adv. 23: 177-202.
Morgan D.A., Ruscetti F.W. & Gallo R. (1976). Selective in vitrogrowth of T lymphocytes from normal human bone marrows. Science. 193: 1007-1008.
Piscitelli SC. & Minor JR. (1995). Role of interleukin-2 in managing infection with the human immunodeficiency virus. Am J Health Syst Pharm. 52: 541-542.
Reichert T.E., Kashii Y., Stanson J., Zeevi A. & Whiteside T.L. (1999). The role of endogenous interleukin-2 in proliferation of human carcinoma cell lines. Br J Cancer. 81: 822-831.
Reichert T.E., Nagashima S., Kashii Y., Stanson J., Gao G., Dou Q.P., & Whiteside T.L. (2000). Interleukin-2 expression in human carcinoma cell lines and its role in cell cycle progression. Oncogene. 19: 514-525.
Rey A., Klein B., Ilnicki C., Jourdan M. & Serrou B. (1984). The role of interleukin-2 in T colony formation by human pre-T cells (pTCFC). Clin Exp Immunol. 58: 154-160.
Sundick RS. & Gill-Dixon C. (1997). A cloned chicken lymphokine homologous to both mammalian IL-2 and IL-15. Journal of immunology (Baltimore, Md.: 1950). 159: 720-725.
Susta L., Diel D.G., Courtney S., Cardenas-Garcia S., Sundick S., Miller P.J., Brown C.C. & Afonso C.L. (2015). Expression of chicken interleukin-2 by a highly virulent strain of Newcastle disease virus leads to decreased systemic viral load but does not significantly affect mortality in chickens. Virol J. 12: 122.
Szatraj K., Szczepankowska AK., Saczynsk, V., Florys K., Gromadzka B., Lepek K., Plucienniczak G., Szewczyk B., Zagorski-Ostoja W. & Bardowski J. (2014). Expression of avian influenza haemagglutinin (H5) and chicken interleukin 2 (chIL-2) under control of the ptcB promoter in Lactococcus lactis. Acta Biochim Pol. 61: 609-614.
Toren A., Ackerstein A., Slavin S. & Nagler A. (1995). Role of interleukin-2 in human hematological malignancies. Med Oncol. 12: 177-186.
Truong A.D., Hong Y., Rengaraj D., Lee J., Lee K. & Hong Y.H. (2018). Identification and functional characterization, including cytokine production modulation, of the novel chicken Interleukin-11. Dev Comp Immunol. 87: 51-63.
Truong A.D., Park B., Ban J. & Hong Y.H. (2016). The novel chicken interleukin 26 protein is overexpressed in T cells and induces proinflammatory cytokines. Vet Res. 47: 65.