Ngày nhận bài: 26-05-2020
Ngày duyệt đăng: 20-07-2020
DOI:
Lượt xem
Download
Cách trích dẫn:
ĐÁNH GIÁ SỰ BIỂU HIỆN CỦA GEN AtZAT12 TRÊN CÂY ARABIDOPSISCHUYỂN GEN
,
Vũ Ngọc Thắng
1
,
Vũ Thị Thúy Hằng
1
,
Trần Anh Tuấn
1
Từ khóa
ZAT12 Ox, điều kiện thiếu Fe, biểu hiện cao
Tóm tắt
ZAT12 là một yếu tố phiên mã đáp ứng stress có sự biểu hiện tăng cao khi cây chịu một số stress như oxy hóa, lạnh và nhiệt…ZAT12 liên kết đáp ứng thiếu sắt với stress oxy hóa thông qua tương tác trực tiếp và điều hòa âm tính với yếu tố phiên mã FIT.Trong nghiên cứu này,các dòng chuyển gen ZAT12được điều khiển bởi promoter của chính gen ZAT12. Mục tiêu của nghiên cứu là tạo được các dòng chuyển gen AtZAT12biểu hiện cao (ZAT12 Ox) đáp ứng lại với stress oxy hóa liên quan đến hấp thụ Fe. Chúng tôi tiến hành chọn lọc các dòng ZAT12 Oxbằng phương pháp quan sát hạt phát huỳnh quang, đọc trình tự và PCR. Các dòng đồng hợp tử được đánh giá sinh trưởng, sự biểu hiện ở mức phiên mã và dịch mã. Kết quả chọn được 4 dòng dương tính T0 (kí hiệu CH1-1, 1-4, 1-10 và 1-14) có sinh trưởng khác biệt, trong đó sinh trưởng của dòng CH1-1 bị ức chế. Trong điều kiện thiếu Fe,các dòng ZAT12 Ox này có biểu hiện tăng cao, nhưng không tăng thêm khi xử lý thêm với H2O2. Sự biểu hiện gen ở mức độ dịch mã cũng đã được quan sát thấy ở dòng CH1-4 bằng Western Blot.
Tài liệu tham khảo
Clough S.J. & BentA.F. (1998). Floral dip: a simplified method for Agrobacterium mediated transformation of Arabidopsis thaliana. The Plant journal: for cell and molecular biology. 16(6): 735-743.
DavletovaaS., Schlauch K., Coutu J. & Mittler R. (2005). The zinc-finger protein ZAT12 plays a central role in reactive oxygen and abiotic stress signaling in Arabidopsis. Plantphysiology.139(2): 847-856.
DavletovabS., Rizhsky L., Liang H., Shengquang Z., Oliver D.J., Coutu J., Shulaev V., Schlauch K. & Mittler R. (2005). Cytosolic ascorbate peroxidase 1 is a central component of the reactive oxygen gene network of Arabidopsis. The plant cell. 17(1): 268-281.
Dinneny J.R., Long T.A., Wang J.Y., Jung J.W., Mace D., Pointer S., Barron C., Brady S.M., Schiefelbein J. & Benfey P.N. (2008). Cell identity mediates the response of Arabidopsis roots to abiotic stress. Science. 320(5878): 942-5.
Hoagland D.R. (1920). Optimum nutrient solutions for plants. Science. 52 (1354):562-564. doi:10.1126/science.52.1354.562
Iida A., Kazuoka T., Torikai S., Kikuchi H. & Oeda K. (2000). A zinc finger protein RHL41 mediates the light acclimatization response in Arabidopsis. The plant journal. 24(2):191-203.
Jakoby M, Wang H. Y., Reidt W., Weisshaar B. & Bauer P. (2004). FRU (BHLH029) is required for induction of iron mobilization genes inArabidopsis thaliana. FEBS Lett. 577(3): 528-534.
Le C.T.T., Brumbarova T., Ivanov R., Stoof C., Weber E. & Mohrbacher J., Fink-Straube C. & Bauer P. (2016).ZincFingerOfarabidopsis Thaliana12(Zat12)interacts with Fer-Like Iron Deficiency-Induced Transcription Factor(FIT) linking iron deficiency and oxidative stress responses. Plant Physiol. 170: 540-557.
Lee S.C., Lan W.Z., Kim B.G., Li Legong, Cheong Y.H., Pandey G.K., Lu G., BuchananB.& Luan S. (2007). A protein phosphorylation/dephosphorylationnetwork regulates a plant potassium channel. Proceedings of the National Academy ofSciences of the USA.104(40): 15959-15964.
Marschner H. (1995). Mineral nutrition of higher plants. 2nded. Academic press. p.11.
Mittler R. (2002). Oxidative stress, antioxidants and stress tolerance. Trends Plant Sci. 7: 405-410.
Rizhsky L., Davletova S., Liang H. & Mittler R. (2004). The zinc finger protein ZAT12 is required for cytosolic ascorbate peroxidase 1 expression during oxidative stress inArabidopsis. The journal of biological chemistry. 279(12): 11736-43.
Sambrook J., Fritsch E.F. & Maniatis T. (1989). Molecular cloning: A laboratory manual. 2nded. New York: Cold Spring Harbor Laboratory Press.
Vogel J.T., Zarka D.G., Van Buskirk H.A., Fowler S.G.& Thomashow M.F. (2005). Roles of the CBF2 and ZAT12 transcription factors in configuring the low temperature transcriptome of Arabidopsis. The plant journal. 41(2): 195-211.
XuJ.,Tran T., Padilla Marcia C.S., Braun D.M. & Goggin F.L. (2017). Superoxide-responsive gene expression in Arabidopsis thalianaand Zea mays. PlantPhysiol. Biochem. 117:51-60.